我们研究的目的是以微创方式监测尿样（L）和麻醉大鼠肿瘤微环境的pH值。大鼠或小鼠的小尿量使pH测量变得困难，因为标准pH电极通常需要几毫升的最小体积才能发挥作用。然而，与我们的研究一样，获得的大鼠尿液量通常L。此外，肿瘤微环境的体内pH监测在技术上非常具有挑战性。PreSens手动显微操作器(MM)与针型(NTH)pH微传感器一起提供了一种简单有效的方法。我们的研究结果表明，与健康个体和组织相比，荷瘤大鼠的尿液和肿瘤微环境的pH值较低。
图2：用于监测麻醉雌性大鼠肿瘤微环境的测量设置示意图：pH微传感器连接到pH-1微发射器，PC与pH-1View软件连接以控制测量。使用手动显微操作器将pH微传感器插入肿瘤微环境中以进行精确定位。
图3：麻醉雌性大鼠肿瘤微环境pH监测示意图：微环境水平和垂直界限不清晰，随肿瘤生长发育而变化。肿瘤位置（黑色）和微传感器注射点（红色）的腹侧（A）和侧向（B）视图，随着肿瘤的生长而变化。
标签。图1：荷瘤(NMU)和健康(CON)大鼠最后实验周的尿液pH值。数据表示为平均值±标准偏差或范围值。
实体瘤包含各种细胞类型，例如癌症细胞、基质细胞或免疫细胞，还包含蛋白质和各种化学信使[1]。这些细胞之间的相互作用形成了独特的肿瘤微环境，并影响肿瘤的生长和发育[2]。结果，在肿瘤微环境中观察到pH差异。虽然恶性实体瘤的细胞外pH值呈酸性，在6.5至6.9的范围内，但正常组织的pH值在7.2至7.5左右时明显偏碱性[3]。全身酸碱平衡在很大程度上是通过肾脏将多余的离子排泄到尿液中来维持的。饮食成分、体重以及癌症等病理状态可能会通过产生某些离子和有机酸来影响尿液pH值[4]。因此，我们检验了大鼠中的肿瘤形成是否对尿液pH值有影响的假设。在我们的实验中，使用了带有针型外壳pH微传感器（PreSens，德国）的微光纤pH计。pH微传感器是小型化玻璃纤维pH传感器，传感器尖端低于m，专为测量小样品量和高空间分辨率而设计。对于肿瘤组织内部的测量，我们另外应用了手动显微操作器（MM，PreSens，德国），因为它允许安全插入微传感器并在样本内精确定位。专为测量小样本量和高空间分辨率而设计。对于肿瘤组织内部的测量，我们另外应用了手动显微操作器（MM，PreSens，德国），因为它允许安全插入微传感器并在样本内精确定位。专为测量小样本量和高空间分辨率而设计。对于肿瘤组织内部的测量，我们另外应用了手动显微操作器（MM，PreSens，德国），因为它允许安全插入微传感器并在样本内精确定位。
材料与方法
雌性Sprague-Dawley大鼠(n=20)年龄31天，体重-g，得自Velaz(netice，捷克共和国)，并适应温度范围为21-24°C，相对湿度为50-65%和人工12:12小时光照：黑暗状态。大鼠喂食标准颗粒（PeterMiko，斯洛伐克），只喝自来水。10只动物（NMU组）在出生后第43天和第50天通过2次腹膜内剂量（50mg/kg体重）的N-甲基-N-亚硝基脲（NMU，Sigma，Germany）诱发乳腺癌。其余10只动物构成健康对照组（CON）。该实验是根据斯洛伐克共和国关于实验动物护理和使用的第号和第/号法律中规定的原则进行的。为了随着时间的推移监测肿瘤发展的pH值，随机选择5只大鼠，每周麻醉一次，为期4周（出生后第10至第13周）。在容量为0mL的感应室中，通过在假地板下方引入的异氟醚进行麻醉。4%浓度的异氟醚气体足以进行短期麻醉（0.2mL/L腔室容积）。图2显示了肿瘤组织中pH测量的实验装置示意图。在实验的最后一周（出生后第14周），获得了每只大鼠的尿液样本。在无菌垫上处理期间，大鼠开始自发排尿。立即将尿液收集到无菌微管中。尿液收集后，使用pH微传感器（PreSens，德国）测量pH值。一个样品的测量潜伏期短于10分钟。使用GraphPadPrism4.0统计软件（GraphPadSoftwareInc.，USA）评估数据。使用Mann-Whitney检验分析结果。为了查看尿液的pH值是否与大鼠肿瘤组织的数量相关，使用了在线Pearson相关系数计算器（
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